| 公开号 |
103571861A |
| 公开日 |
2014年2月12日 |
| 申请人 |
深圳市绿微康生物工程有限公司 |
| 发明人 |
张田 王剑英 唐克轩 林智
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| 摘要 |
本发明公开了一种青霉基因工程菌的制备方法及青霉基因工程菌的应用，所述方法为：获得潮霉素抗性表达盒并克隆到目标质粒上，获得潮霉素抗性的重组质粒；分别克隆青霉脂肪酶基因ＰＥＬ、扩展青霉甘油醛－３－磷酸脱氢酶启动子ＰｇｐｄＰ和构巢曲霉色氨酸合成酶终止子ＴｔｒｐＣ，得到有强启动子驱动的ＰＥＬ基因表达盒；将ＰＥＬ基因表达盒克隆到潮霉素抗性的重组质粒中，获得含潮霉素筛选标记ＰＥＬ基因超表达载体；将该超表达载体转化工程农杆菌，利用农杆菌介导转化法将ＰＥＬ基因表达盒转化到青霉菌株中，得到青霉基因工程菌。本发明获得的青霉工程菌产脂肪酶能力强，青霉工程菌制备的脂肪酶酶活比出发菌青霉野生菌提高了１００％～１５０％。 |
| 法律状态 |
| 法律状态公告日 |
法律状态 |
法律状态详情 |
| 20140212 |
公开 |
公开 |
| 20140312 |
实质审查的生效 |
实质审查的生效 |
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| 主权利要求 |
１．一种青霉基因工程菌的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：（１）获得潮霉素抗性表达盒并克隆到目标质粒上，获得潮霉素抗性的重组质粒；（２）分别克隆青霉脂肪酶基因ＰＥＬ、扩展青霉甘油醛－３－磷酸脱氢酶启动子ＰｇｐｄＰ和构巢曲霉色氨酸合成酶终止子ＴｔｒｐＣ，得到有强启动子驱动的ＰＥＬ基因表达盒；（３）将所述ＰＥＬ基因表达盒克隆到潮霉素抗性的重组质粒中，获得含潮霉素筛选标记ＰＥＬ基因超表达载体；（４）将含潮霉素筛选标记ＰＥＬ基因超表达载体转化工程农杆菌，利用农杆菌介导转化法将ＰＥＩ基因表达盒转化到青霉菌株中，得到所述的青霉基因工程菌。 |
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