| 公开号 |
104115750A |
| 公开日 |
2014年10月29日 |
| 申请人 |
贵州沿河乌江生物科技发展有限公司 |
| 发明人 |
王高平 许东东 孟彪 冯新建
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| 摘要 |
本发明公开了一种空心李组培快繁脱毒的方法，包括如下步骤：１）植体的选取与预处理，２）茎尖的剥离，３）茎尖的诱导培养，４）增殖培养，５）生根培养，６）脱毒苗的培养，７）病毒病菌检测。本发明将茎尖脱毒、高温处理脱毒法和化学试剂脱毒法三种方式相结合，对沙子空心李育苗的组织培养、快速繁育具有良好的去病毒作用，获得的脱毒苗经病毒检测，所有育苗均脱毒成功，无李矮缩病毒（ＰＤＶ）、李坏死环斑病毒（ＰＮＲＳＶ）感染。利用该方法对空心李进脱毒处理，通过组培培育出新的无病毒的空心李树苗，再经过驯化和移栽，从而达到增加产量，改善水果口感的目的。 |
| 法律状态 |
| 法律状态公告日 |
法律状态 |
法律状态详情 |
| 20141029 |
公开 |
公开 |
| 20141203 |
实质审查的生效 |
实质审查的生效 |
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| 主权利要求 |
１．一种空心李组培快繁脱毒的方法，包括如下步骤：１）植体的选取与预处理：将沙子空心李植株上的健壮枝条剪下，用生根剂处理后，扦插在经过处理的人工基质上，待成活长出新芽后转入培养室内，每日于３５－４０℃、２０００－３０００Ｌｕｘ光照条件下培养１４－１８小时，然后在常温、黑暗条件下培养６－１０小时，共培养２８－３５天；２）茎尖的剥离：取经步骤１）预处理后的空心李粗壮的茎芽，剥去叶片，冲洗干净后进行常规消毒，然后将茎芽置于４０倍解剖镜下，用无毒解剖针将叶片和叶原基剥掉，分离出茎芽顶端的分生组织，然后将其快速接种至诱导培养基中；３）茎尖的诱导培养：将在诱导培养基中接种好的茎尖置于２２－２８℃、１５００－２０００Ｌｕｘ的光照条件下每天培养１４－１８小时，直至长成小苗；４）增殖培养：待小苗长至１－１．５ｃｍ高时，切下茎尖部分，转移到增殖培养基上继续培养，培养条件为：每日３２－３８℃、１５００－２０００Ｌｕｘ光照１２－１６小时，常温培养８－１２小时；苗高２ｃｍ时，剪取小苗叶片进行病毒检测，通过检测后确认无病毒的小苗，切段转移到增殖培养基上继续培养至１０－２０倍数量；５）生根培养：将步骤４）增殖形成的小苗分成单株，转移到生根培养基上，在常温下进行生根培养，长成生根组培苗；６）脱毒苗的培养：将已生根的小苗从瓶内取出，洗净根部的培养基，晾干，然后在中抗病毒药剂中浸泡一下，用灭菌处理过的苔藓包根，栽在鱼苗钵或育苗盘内，置于具有防虫网的温棚内进行培养，待小苗生长成正常植株后，剪取枝条扦插，育成生产用的脱毒苗；７）病毒病菌检测：采用草本植物指示检测法或电镜检测法对步骤５）的脱毒苗进行检测。 |
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