公开号：103554287A
公开日：2014年2月5日
申请人： 甘肃省商业科技研究所
发明人：陈朋 严晓娟 梁宁 胡先望
摘要：本发明涉及一种美味牛肝菌菌丝多糖的提取方法，该方法包括以下步骤：⑴制备马铃薯葡萄糖斜面培养基；⑵制备种子培养基；⑶制备发酵培养基；⑷将美味牛肝菌菌丝接种至马铃薯葡萄糖斜面培养基，经恒温培养得菌丝体；⑸菌丝体接种至种子培养基，经振荡培养得菌种种子液；⑹菌种种子液接种至发酵培养基，经振荡培养得发酵液；离心、洗涤、烘干、磨粉后，得到菌丝体干粉末；⑺菌丝体干粉末先超声提取再浸提得到多糖浸提液；⑻多糖浸提液与正丁醇－三氯乙酸溶液混合后离心后即得多糖提取液；⑼多糖提取液加乙醇静置，得沉淀物；⑽沉淀物离心、洗涤、干燥，即得美味牛肝菌多糖。本发明操作简单，成本低，多糖得率高。
法律状态：

法律状态公告日	法律状态	法律状态详情
20140205	公开	公开
20140312	实质审查的生效	实质审查的生效

主权利要求：１．一种美味牛肝菌菌丝多糖的提取方法，包括以下步骤：⑴制备马铃薯葡萄糖斜面培养基：将马铃薯洗净去皮切碎，按其质量的４～６倍加水煮沸２５～３５ｍｉｎ后用纱布过滤，得到滤液Ａ，该滤液Ａ补足至１．０Ｌ依次加入５～１０ｇ葡萄糖和５～１０ｇ琼脂，使其ｐＨ值为６．０～８．０，在９０～１００℃温度下充分加热溶解后分装，在压强为１．０５Ｋｇ／ｃｍ２、温度为１２１℃的条件下灭菌２０ｍｉｎ即得；⑵制备种子培养基：将马铃薯洗净去皮切碎，按其质量的４～６倍加水煮沸２５～３５ｍｉｎ后用纱布过滤，得到滤液Ｂ，该滤液Ｂ补足至１．０Ｌ加入５～１０ｇ葡萄糖，使其ｐＨ值为６．０～８．０，在９０～１００℃温度下充分加热溶解后分装，在压强为１．０５Ｋｇ／ｃｍ２、温度为１２１℃的条件下灭菌２０ｍｉｎ即得；⑶制备发酵培养基：将马铃薯洗净去皮切碎，按其质量的４～６倍加水煮沸２５～３５ｍｉｎ后用纱布过滤，得到滤液Ｃ，该滤液Ｃ补足至１．０Ｌ加入５～１０ｇ葡萄糖，使其ｐＨ值为６．０～８．０，在９０～１００℃温度下充分加热溶解后分装，在压强为１．０５Ｋｇ／ｃｍ２、温度为１２１℃的条件下灭菌２０ｍｉｎ即得；⑷真菌的发酵培养：接一环美味牛肝菌菌丝至所述马铃薯葡萄糖斜面培养基上，于２８℃恒温培养４～１０天后，置于４℃冰箱中，得到活化培养后的菌丝体；⑸接一环所述活化培养后的菌丝体至装有１０ｍＬ所述种子培养基的试管中，并置于恒温振荡器上，在２８℃条件下以１００～２００　ｒ／ｍｉｎ的速率进行振荡培养４～１０天，制得ｐＨ值为５．０～７．０的菌种种子液；⑹将所述菌种种子液按５～２０％的接种量接种至含有所述发酵培养基的摇瓶中，并置于恒温振荡器上，在２８℃条件下以１００～２００　ｒ／ｍｉｎ的速率进行振荡培养４～１０天，即得发酵液；所述发酵液在高速冷冻离心机中于５０００ｒ／ｍｉｎ离心２０ｍｉｎ，得到菌丝体；所述菌丝体用蒸馏水洗涤后在真空干燥箱于６０℃下烘干至恒重后磨成粉，得到菌丝体干粉末；所述发酵培养基在所述摇瓶中的装瓶量为１０～３０％；⑺在所述菌丝体干粉末中按１　ｇ：５　ｍＬ　～２０ｍＬ的料液比加入去离子水，在功率为１００～３００Ｗ的条件下超声提取１０～２０　ｍｉｎ后，在温度为７０～９０℃的条件下浸提次数２～４次，每次１～３ｈ，合并提取液，得到多糖浸提液；⑻将所述多糖浸提液与正丁醇－三氯乙酸溶液按１ｍＬ：１ｍＬ的比例，充分混合，在转速１５
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